微流控流式細胞儀作為細胞分析領域的革新性工具,其核心技術貫穿流體操控、光學檢測與信號處理全鏈條,通過微米級流體通道與高精度檢測系統(tǒng)的協(xié)同,實現(xiàn)了對單細胞的快速、精準分析。
流體操控技術是微流控流式細胞儀的基礎。其核心在于利用微米級通道的流體動力學特性,通過鞘液包裹與流速差控制,將細胞懸液聚焦成單細胞流。例如,微毛細管技術通過負壓區(qū)形成穩(wěn)定的單細胞上行流,確保每個細胞獨立通過檢測區(qū)域,最小樣本量可低至1000個細胞,且運行8小時僅產(chǎn)生50ml廢液。此外,聲電泳(AP)、介電泳(DEP)等主動聚焦技術進一步提升了細胞排列的精確性,為后續(xù)檢測提供穩(wěn)定信號源。
光學檢測系統(tǒng)是細胞信息獲取的關鍵。激光束垂直照射單細胞流,產(chǎn)生前向散射光(FSC)和側向散射光(SSC),分別反映細胞大小和內部顆粒度。例如,低SSC信號可區(qū)分淋巴細胞與高SSC的粒細胞。同時,系統(tǒng)集成多色熒光檢測模塊,通過帶通濾光片(如690/50nm)精準匹配熒光染料激發(fā)/發(fā)射光譜,結合光電倍增管(PMT)或CMOS傳感器,實現(xiàn)多參數(shù)同步檢測,單細胞分析參數(shù)可達數(shù)十個。
信號處理與分析技術則賦予儀器智能化決策能力。芯片上集成的電子系統(tǒng)對散射光和熒光信號進行實時放大與模數(shù)轉換,通過阻抗相位角-振幅散點圖區(qū)分活細胞與死細胞,或利用深度學習算法自動化識別細胞亞群。例如,在癌癥診斷中,系統(tǒng)可高通量檢測循環(huán)腫瘤細胞(CTC),并通過阻抗數(shù)據(jù)快速量化腫瘤細胞活性,為治療提供依據(jù)。
這些核心技術的融合,使微流控流式細胞儀在稀有細胞檢測、床旁診斷及資源有限地區(qū)推廣中展現(xiàn)出優(yōu)勢,成為精準醫(yī)療與生物醫(yī)學研究的重要工具。